- Lid geworden
- 8 okt 2010
- Berichten
- 33.532
- Waardering
- 22.270
- Lengte
- 1m96
- Massa
- 102kg
- Vetpercentage
- 11%
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23470307
Incubatie van ratspiercellen met 100 nM testosteron (hier komen alle kuurders wel aan) zorgt voor hypertrofie al na 12 uur (CSA stijging van 35%, let wel dat je een dergelijke stijging in CSA dus niet van een gehele spier gaat meten om duidelijke redenen). De hoeveelheid celkernen blijft hetzelfde op deze korte termijn. Verder wordt er een flinke stijging in actine mRNA gevonden (120% na 6 uur), als ook actine eiwit (i.e. het komt dus ook tot translatie, gezien deze stijgen met een whopping 191% t.o.v. control na 12 uur). mRNA niveaus van MAFbx en MuRF-1 blijven ongewijzigd na 6 uur (ubiquitine ligases die zorgen voor proteolyse, i.e. katabool). Verder activeert testosteron al vrij snel de mTOR pathway. Na 60 minuten is er een piek in S6K1 fosforylatie (ligt downstream van mTOR en fosforyleert het ribosomale eiwit S6 die eiwit translatie stimuleert). De pathway verloopt upstream van mTOR via PI3K/Akt (ERK1/2 wordt ook gefosforyleerd maar remming hiervan heeft geen effect op fosforylatie van S6K1). Ondanks deze snelle resultaten is activatie van de traditionele AR toch vereist voor hypertrofie van de spiercellen wat crosstalk suggereert tussen de traditionele AR en de PI3K/Akt/mTOR pathway (die dus wordt geactiveerd door een GPCR) in deze.
Cliffs:PURPOSE:
The anabolic hormone testosterone induces muscle hypertrophy, but the intracellular mechanisms involved are poorly known. We addressed the question whether signal transduction pathways other than the androgen receptor (AR) are necessary to elicit hypertrophy in skeletal muscle myotubes.
METHODS:
Cultured rat skeletal muscle myotubes were preincubated with inhibitors for ERK1/2 (PD98059), PI3K/Akt (LY294002 and Akt inhibitor VIII) or mTOR/S6K1 (rapamycin), and then stimulated with 100 nM testosterone. The expression of α-actin and the phosphorylation levels of ERK1/2, Akt and S6K1 (a downstream target for mTOR) were measured by Western blot. mRNA levels were evaluated by real time RT-PCR. Myotube size and sarcomerization were determined by confocal microscopy. Inhibition of AR was assessed by bicalutamide.
RESULTS:
Testosterone-induced myotube hypertrophy was assessed as increased myotube cross-sectional area (CSA) and increased α-actin mRNA and α-actin protein levels, with no changes in mRNA expression of atrogenes (MAFbx and MuRF-1). Morphological development of myotube sarcomeres was evident in testosterone-stimulated myotubes. Known hypertrophy signaling pathways were studied at short times: ERK1/2 and Akt showed an increase in phosphorylation status after testosterone stimulus at 5 and 15 min, respectively. S6K1 was phosphorylated at 60 min. This response was abolished by PI3K/Akt and mTOR inhibition but not by ERK1/2 inhibition. Similarly, the CSA increase at 12 h was abolished by inhibitors of the PI3K/Akt pathway as well as by AR inhibition.
CONCLUSIONS:
These results suggest a crosstalk between pathways involving fast intracellular signaling and the AR to explain testosterone-induced skeletal muscle hypertrophy.
Incubatie van ratspiercellen met 100 nM testosteron (hier komen alle kuurders wel aan) zorgt voor hypertrofie al na 12 uur (CSA stijging van 35%, let wel dat je een dergelijke stijging in CSA dus niet van een gehele spier gaat meten om duidelijke redenen). De hoeveelheid celkernen blijft hetzelfde op deze korte termijn. Verder wordt er een flinke stijging in actine mRNA gevonden (120% na 6 uur), als ook actine eiwit (i.e. het komt dus ook tot translatie, gezien deze stijgen met een whopping 191% t.o.v. control na 12 uur). mRNA niveaus van MAFbx en MuRF-1 blijven ongewijzigd na 6 uur (ubiquitine ligases die zorgen voor proteolyse, i.e. katabool). Verder activeert testosteron al vrij snel de mTOR pathway. Na 60 minuten is er een piek in S6K1 fosforylatie (ligt downstream van mTOR en fosforyleert het ribosomale eiwit S6 die eiwit translatie stimuleert). De pathway verloopt upstream van mTOR via PI3K/Akt (ERK1/2 wordt ook gefosforyleerd maar remming hiervan heeft geen effect op fosforylatie van S6K1). Ondanks deze snelle resultaten is activatie van de traditionele AR toch vereist voor hypertrofie van de spiercellen wat crosstalk suggereert tussen de traditionele AR en de PI3K/Akt/mTOR pathway (die dus wordt geactiveerd door een GPCR) in deze.